Abstract: Quinoa has been recognized as the sole “comprehensive nutritional crop”; however, it is susceptible to pre-harvest sprouting (PHS). While quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-qPCR) has been extensively employed for gene expression level detection, the selection of suitable reference genes is imperative to ensure precise gene expression quantification across diverse conditions. This study aims to identify stable reference genes in quinoa seeds under ABA and GA, in order to provide a basis for subsequent research on PHS. Seeds were subjected to different concentrations of ABA and GA (10 μM, 50 μM, 100 μM, and 200 μM). The most suitable treatment concentration was determined based on seed viability. Here, MON1, GAPDH, EIF3, EF1α, ACT, TUB1, and TUB6 were selected as candidate genes. The suitability of these reference genes under different conditions was assessed using various methods including Ct values, geNorm, NormFinder, BestKeeper, Delta Ct, and RefFinder. Based on the results obtained from the hormone experiments, it was observed that the application of 100 μM ABA and 200 μM GA yielded the most advantageous outcomes. Additionally, the most appropriate reference genes for different treatments are ACT and TUB1 (H2O treatment), EIF3 and MON1 (ABA, GA treatment and also for the combined data set of the three groups). However, GAPDH exhibited the least stability across all treatments. In summary, ACT is recommended as the reference gene for natural quinoa germination, while EIF3 and MON1 should be used for ABA and GA treatments.

Resumo: A quinoa foi reconhecida como a única “cultura nutricional abrangente”; no entanto, é suscetível à germinação na pré-colheita (BHS). Embora a reação em cadeia da polimerase com transcrição reversa quantitativa (RT-qPCR) tenha sido amplamente empregada para detecção do nível de expressão gênica, a seleção de genes de referência adequados é essencial para garantir a quantificação precisa da expressão gênica em diversas condições. Este estudo tem como objetivo identificar genes de referência estáveis em sementes de quinoa tratadas com ABA e GA, a fim de fornecer uma base para pesquisas subsequentes em BPC. As sementes foram submetidas a diferentes concentrações de ABA e GA (10 μM, 50 μM, 100 μM e 200 μM). A concentração de tratamento mais adequada foi determinada com base na viabilidade das sementes. MON1, GAPDH, EIF3, EF1α, ACT, TUB1 e TUB6 foram selecionados como genes candidatos. A adequação destes genes de referência sob diferentes condições foi avaliada utilizando vários métodos, incluindo valores Ct, geNorm, NormFinder, BestKeeper, Delta Ct e RefFinder. Com base nos resultados obtidos nos experimentos com hormônios, observou-se que a aplicação de 100 μM de ABA e 200 μM de GA produziu os resultados mais vantajosos. Além disso, os genes de referência mais apropriados para diferentes tratamentos são ACT e TUB1 (tratamento com H2O), EIF3 e MON1 (tratamento com ABA, GA e para o conjunto de dados combinados dos três grupos). No entanto, o GAPDH exibiu a menor estabilidade em todos os tratamentos. Em resumo, o ACT é recomendado como gene de referência para a germinação natural da quinoa, enquanto o EIF3 e o MON1 devem ser utilizados para os tratamentos com ABA e GA.

RESUMEN El propósito de este trabajo es investigar la fuente de luz estándar para calificar y mostrar el color de jadeíta roja y clasificarlo. Con el espectrómetro Raman, el espectrofotómetro ultravioleta-visible y el espectrómetro de fluorescencia de rayos X, los resultados muestran que el Fe 3+ es el principal mineral cromogénico de la jadeíta roja, que se correlaciona negativamente con el ángulo tonal, mientras que el color de la jadeíta roja tiene una correlación positiva con el contenido de hematita. El color de 120 muestras de jadeíta roja se examinó recogiendo el reflectante señalado desde la superficie de la muestra utilizando una esfera de integración con el espectrofotómetro portátil X-Rite SP62 basado en espacio de color uniforme CIE 1976 L*a*b*. Se analizaron los parámetros de color de las muestras de jadeíta bajo las fuentes de luz estándar D65, A y CWF. El espectro de luz de la fuente de luz D65 es continuo, relativamente suavizado con alta temperatura de color, lo que hace que el color de la muestra sea similar al de la luz natural y puede usarse como la mejor fuente de luz de evaluación. Una fuente de luz contribuye a mejorar el tono rojo de jadeíta, que es la mejor fuente de luz para la exhibición comercial de jadeíta roja. La fuente de luz CWF se puede utilizar como iluminación auxiliar para la evaluación del color. El color de la jadeíta roja se divide en cinco niveles, de mejor a peor, utilizando el análisis de conglomerados K-Means y el análisis discriminante de Fisher bajo la fuente de luz D65: Fancy Vivid, Fancy Deep, Fancy Intense, Fancy dark y Fancy.

ABSTRACT The purpose of this paper is to investigate the standard light source for grading and displaying the color of red jadeite and to classify the color. With Raman spectrometer, ultraviolet-visible spectrophotometer and X-ray fluorescence spectrometer, the results show that, the Fe 3+ is the main chromogenic mineral of red jadeite, which negatively correlates with the tonal angle, while the color of red jadeite has a positive correlation with the hematite content. The color of 120 red jadeite samples was examined by collecting the reflective signaled from the sample surface using an integrating sphere with the portable X-Rite SP62 spectrophotometer based on CIE 1976 L*a*b* uniform color space. The color parameters of jadeite samples under D65, A and CWF standard light sources were analyzed. The light spectrum of D65 light source is continuous, relatively smoothed with high color temperature, which makes the sample color close to that under the natural light and can be used as the best evaluation light source. A light source contributes to improve the red tone of jadeite, which is the best light source for commercial display of red jadeite. CWF light source can be used as the auxiliary lighting for color evaluation. The color of red jadeite is divided into five levels from best to worst using K-Means cluster analysis and Fisher discriminant analysis under D65 light source: Fancy Vivid, Fancy Deep, Fancy Intense, Fancy dark and Fancy.